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dc.contributor.advisorDR. GARCÍA HERNÁNDEZ, NORMAND-
dc.contributor.advisorDR. MÉNDEZ TENORIO, ALFONSO-
dc.contributor.authorIBQ. PEDROZA TORRES, ABRAHAM-
dc.date.accessioned2013-05-22T21:16:25Z-
dc.date.available2013-05-22T21:16:25Z-
dc.date.issued2011-06-22-
dc.identifier.urihttp://www.repositoriodigital.ipn.mx/handle/123456789/16064-
dc.descriptionEn México a partir del 2006 el cáncer de mama es la primera causa de muerte por neoplasias en mujeres, los datos de incidencia se reportan en 38 por 100,000 habitantes. Se han identificado la mayoría de los factores de riesgo, sin embargo, la etiología aún es desconocida. Los factores identificados incluyen: a) Factores genéticos: historia familiar con cáncer, principalmente mutaciones en los genes BRCA-1 y/o BRCA-2, b) Factores endocrinos: larga exposición a estrógenos, nuliparidad, menarca temprana y menopausia tardía y c) Factores exógenos: Dieta, consumo de alcohol, cigarrillos, agentes químicos, radiaciones ionizantes, etc. Recientemente diversos grupos de trabajo han sugerido la posibilidad de que un retrovirus (el Virus del Tumor Mamario Murino o MMTV) pudiera ser el agente etiológico de algunos canceres de mama. El objetivo del presente trabajo es identificar un fragmento de 250 pb. del gen env del MMTV en adenocarcinomas mamarios en mujeres mexicanas y evaluar los sitios de inserción del retrovirus mediante PCR splinkerette. Se analizaron 56 muestras de adenocarcinoma mamarios y tejidos no afectados. Las muestras fueron procesadas y el DNA extraído. La extracción del DNA se realizó mediante el equipo QIAcube siguiendo las indicaciones del fabricante. Se verificó la integridad y se cuantificó para una posterior PCR anidada, para la cual se utilizaron los oligonucleótidos propuestos por Wang y col. en 1995. Se utilizó una construcción hecha con el gen env del MMTV cepa C3H sobre un plásmido pBR322 y propagado en E.coli HB101 como control positivo de reacción, así mismo se amplifico un fragmento de 500pb del gen GAPDH para verificar la utilidad de los DNAs. Una vez identificados los productos de PCR positivos para env estos fueron secuenciados y las secuencias alineadas con BLAST 2.2.24. Una vez detectadas las muestras positivas para MMTV éstas fueron evaluadas mediante PCR splinkerette para detectar los posibles sitios de inserción del retrovirus. Se detectó la presencia de secuencias parecidas al gen env del MMTV en 16 (40%) de las muestras analizadas y en ninguno de los tejidos no afectados. Los alineamientos hechos a las secuencias amplificadas arrojaron una similitud del 96- 98% entre las secuencias amplificadas y el gen env del MMTV. Los análisis hechos mediante PCR splinkerette arrojaron diversos sitios de amplificación, se pudieron detectar 12 secuencias (genes y regiones intergénicas) entre ellas: proteína nucleoral 4, Factor de iniciación 5, proteína de ensamble a nucleosoma 1, Factor 6 de crecimiento, proteína. Es posible detectar secuencias del MMTV en adenocarcinomas mamarios de mujeres mexicanas. Las secuencias obtenidas de los amplificados detectados en los adenocarcinomas mamarios corresponden hasta en un 98% de homología al gen env del MMTV depositado en el NCBI. Algunos de los genes detectados están involucrados en procesos diferenciació y crecimiento celular.es
dc.description.abstractIn Mexico from 2006 breast cancer is the leading cause of death from malignancy in women, incidence data are reported at 38 per 100,000 habitants. Have identified most of the risk factors, however, the etiology is unknown. The factors identified include: a) Genetic factors: family history of cancer, especially mutations in the BRCA-1 and / or BRCA-2 genes, b) Endocrine factors: long exposure to estrogen, nulliparity, early menarche and late menopause c) Factors Exogenous: diet, alcohol, cigarettes, chemicals, radiation, etc.. Recently, several working groups have suggested the possibility that a retrovirus (the murine mammary tumor virus or MMTV) may be the causative agent of some breast cancers. The aim of this study is to identify a fragment of 250 bp. MMTV env gene in mammary adenocarcinomas in Mexican women and evaluate the retrovirus insertion sites by PCR splinkerette. We analyzed 56 samples of breast adenocarcinoma and uninvolved tissue. Samples were processed and DNA extracted. DNA extraction was performed using the computer QIAcube following manufacturer's instructions. Integrity was verified and quantified for subsequent nested PCR, for which we used oligonucleotide proposed by Wang et al. in 1995. We used a construction made by the env gene of MMTV C3H strain on a plasmid pBR322 and propagated in E.coli HB101 as a positive control reaction, so it was amplified a 500pb fragment of the gene GAPDH to verify the usefulness of the DNAs. Having identified the positive PCR products were sequenced and env these sequences aligned with BLAST 2.2.24. Having detected these MMTV-positive samples were tested by PCR to detect possible splinkerette insertion sites of retrovirus. Detected the presence of sequences similar to MMTV env gene in 16 (40%) of the samples and the tissues unaffected. The alignments made to the amplified sequences showed a similarity of 96 - 98% between the amplified sequences and the MMTV env gene. The analysis made by PCR yielded different sites splinkerette amplification could be detected 12 sequences (genes and intergenic regions) including: protein nucleoral 4, initiation factor 5, a nucleosome assembly protein 1, Factor 6, growth, protein. Sequences can be detected MMTV in mammary adenocarcinomas of Mexican women. The sequences obtained from amplicons detected in breast adenocarcinomas are up to 98% homology to MMTV env gene deposited in the NCBI. Some of the genes identified are involved in cell growth and differentiation processes.es
dc.language.isoeses
dc.subjectMUTAGÉNESISes
dc.subjectRETROVIRUSes
dc.subjectMMTVes
dc.subjectHMTVes
dc.titleESTUDIO DE MUTAGÉNESIS INSERCIONAL DEL RETROVIRUS MMTV/HMTV EN MUESTRAS DE ADENOCARCINOMAS MAMARIOS DE MUJERES MEXICANASes
dc.typeThesises
dc.description.especialidadMAESTRÍA EN CIENCIAS EN BIOMEDICINA Y BIOTECNOLOGÍA MOLECULARes
dc.description.tipoPDFes
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