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Título : Direccionamiento del metabolismo primario a metabolismo secundario para la evaluación de la producción de actinorrodina por medio de la modulación de citrato sintasa y aconitasa en Streptomyces coelicolor
Autor : Dra. Cortés Espinosa, Diana V.
Dr. Absalón Constantino, Ángel E.
Pérez Curiel, Julieta
Palabras clave : metabolismo
actinorrodina
citrato sintasa
aconitasa
Streptomyces coelicolor
Fecha de publicación : 22-nov-2011
Resumen : During the life cycle of Streptomyces can distinguish two types of metabolism, primary and secondary. The primary metabolism is defined as the sum of anabolic and catabolic reactions that result in the maintenance of vital cell processes (synthesis of fatty acids, proteins, lipids, polysaccharides, coenzymes, etc ...) and the increase in total biomass. These processes are essentially identical in all living cells. By contrast, in secondary metabolism products are formed that are not essential for the growth of the organism producing complex chemical structures of the body, usually synthesized at the beginning of the stationary phase. However, products originating usually confer ecological advantages and consequently greater biological competitiveness. The objective of this research was to increase the production of actinorrodiana, secondary metabolite of S. coelicolor, by overexpression and silencing of the two first enzymes of the Krebs cycle, citrate synthase and aconitase. It has been reported overexpression of the enzyme acetyl-CoA carboxylase improving the performance of actinorhodin production, this project results in overexpression of citrate synthase and aconitase actinorhodin production was affected by pH declines presented in the first 48 hrs. For the muting technique using antisense RNA in S. coelicolor so far not been reported using this technique. The study of citrate synthase and aconitase in S. coelicor has been reported by the disruption of genes producing actinorhodin non-producing clones and lethal phenotypes. We present an alternative to generate clones with silenced lethal phenotypes actinorhodin production is influenced by pH values below pH 6 where actinorrodina does not support these values achieved.
Descripción : Durante el ciclo biológico de Streptomyces se pueden diferenciar dos tipos de metabolismo, primario y secundario. El metabolismo primario se define como el conjunto de reacciones anabólicas y catabólicas cuyo resultado es el mantenimiento de los procesos vitales de la célula (síntesis de ácidos grasos, proteínas, lípidos, polisacáridos, coenzimas etc…) y el incremento de la biomasa total. Estos procesos son esencialmente idénticos en todas las células vivas. Por el contrario, en el metabolismo secundario se forman productos que no son esenciales para el crecimiento del organismo productor de estructuras químicas complejas del organismo, sintetizados generalmente al comienzo de la fase estacionaria. No obstante, los productos originados suelen conferir ventajas ecológicas y consecuentemente una mayor competitividad biológica. El objetivo del presente trabajo fue aumentar la producción de actinorrodiana, metabolito secundario de S. coelicolor, por medio de la sobreexpresión y silenciamiento de las dos primeras enzimas del ciclo de krebs, citrato sintasa y aconitasa. Se ha reportado la sobreexpresión de la enzima acetyl-CoA carboxilasa mejorando el rendimiento de producción de ACT; resultados en este proyecto la sobreexpresión de citrato sintasa y aconitasa la producción de ACT se vio afectada por los descensos de pH presentados en las primeras 48 hrs. En el caso del silenciamiento por medio de la técnica de ARN antisentido en S. coelicolor hasta el momento no se ha reportado el uso de ésta técnica. El estudio de citrato sintasa y aconitasa en S. coelicor se ha reportado por la interrupción de los genes generando clonas no productoras de ACT y fenotipos letales. Nosotros presentamos la alternativa de generar clonas silenciadas con fenotipos no letales y la producción de ACT está influenciada por valores de pH por debajo de pH 6 donde la actinorrodina no es favorable a estos valores alcanzados.
URI : http://www.repositoriodigital.ipn.mx/handle/123456789/16074
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