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http://repositoriodigital.ipn.mx/handle/123456789/16018
Título : | “DESARROLLO DE UN MICROARREGLO PARA LA IDENTIFICACIÓN DE MUTACIONES PUNTUALES MEDIANTE EL USO DE LA HIBRIDACIÓN EN TÁNDEM Y UN SISTEMA DE DETECCIÓN COLORIMÉTRICO USANDO COMO MODELO EL GEN DE CAPN10” |
Autor : | DR. SANTIAGO HERNANDEZ, JUAN CARLOS DR. MENDEZ TENORIO, ALFONSO IBQ. DE LOS REYES GUILLÉN, FRANCISCO XAVIER |
Palabras clave : | DESARROLLO DE UN MICROARREGLO IDENTIFICACIÓN DE MUTACIONES HIBRIDACIÓN EN TÁNDEM SISTEMA DE DETECCIÓN COLORIMÉTRICO GEN DE CAPN10 |
Fecha de publicación : | 1-dic-2011 |
Resumen : | ABSTRACT Microarrays are a powerful tool in the area of molecular diagnosis as well as to analyze the expression of genes. But now involve some difficulties for some laboratories do not have adequate infrastructure, equipment to analyze the microarrays are expensive, because the fluorescence labeling is traversed, and requires a microarray reader that emits a specific wavelength, this reason we have developed a colorimetric detection system based on the dial with biotin and a secondary detection system in which a estreptavidina enzyme conjugate and alkaline phosphatase coupled to biotin after washing identifying the duplex formed by a substrate chromogen which is catalyzed by alkaline fofatasa through this is done by the hybridization in tandem technique which allows to achieve more reliable results, the specificity of this detection system is 80.12% and 82% sensitivity, dynamic range was 11.25 pmoles being so cheap and reliable option to perform diagnostic experiments and gene expression among others. |
Descripción : | RESUMEN Los microarreglos son una herramienta poderosa en el área de diagnóstico molecular así como para analizar la expresión de genes. Sin embargo actualmente conllevan algunas dificultades para algunos laboratorios que no tienen la infraestructura adecuada, los equipos para analizar los microarreglos son costosos, ya que el marcaje es a través de fluorescencia y se necesita un lector de microarreglos que emita una longitud de onda específica, por este motivo se ha desarrollado un sistema de detección colorimétrico basado en el marcaje con biotina y un sistema de detección secundario en el que un conjugado enzimático de estreptavidina y fosfatasa alcalina se acopla a la biotina presente en las hibridaciones complementarias, ya que por medio de lavados se lleva a cabo la discriminación de las hibridaciones no complementarias y por lo cual no se produce la marca producto del sustrato cromogénico catalizado por la fosfatasa alcalina esto se hace a través de la técnica de hibridación en tándem la cual permite lograr resultados más confiables, la especificidad de este sistema de detección es de 80.12% y la sensibilidad 82%, el rango dinámico fue de 11.25 picomoles siendo así una opción económica y confiable para llevar a cabo experimentos de diagnóstico y expresión génica entre otros. |
URI : | http://www.repositoriodigital.ipn.mx/handle/123456789/16018 |
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