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Título : EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DE CEPAS HÍBRIDAS DE Pleurotus spp
Autor : DR. VALENCIA DEL TORO, GUSTAVO
M. en C. GARÍN AGUILAR, MARÍA EUGENIA
CRUZ SOLORIO, ANGÉLICA
Palabras clave : ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA
CEPAS HÍBRIDAS
Pleurotus spp
Fecha de publicación : 24-jun-2011
Resumen : Four parental strains of Pleurotus spp. were used (POS, SEC, PCM y UAP9) and 8 hybrid strains (PAUA, PAUB, PAPO, SAUA, SAUB, SAPA, SAPO Y UAPO). Strains were grown and harvested for methanol and hexane extracts from fresh fruiting bodies. The agar diffusion method of Kirby Bauer was used to determine the antibacterial activity of extracts on Gram-positive bacteria: Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus (ATCC 123989), Staphylococcus aureus clinical isolate (CINVESTAV-IPN) and Gram-negative: Klebsiella pneumoniae (ATCC 13 884), Enterobacter agglomerans (ATCC 27155), Yersinia enterocolitica, Shigella dysenteriae (Indre B2188) and Klebsiella rhinoescleromatis. For testing paper discs prepared with 8 mg of extract and positive control discs with 15 g of chloramphenicol. The microdilution plate method was used to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of the extracts showed antibacterial activity. Subsequently, we performed column chromatography of methanol extracts of the parental strains PCM, POS and UAP9 and hybrid PAPO, and the collected fractions was determined the MIC using a concentration range of 0.35 to 4 mg/mL. The two-factor ANOVA indicated that the hybrid strain PAPO presented larger inhibition diameters (11 to 15 mm) and Gram-positive bacteria Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis were the most sensitive organisms. The fraction F9 of PCM extract presented a MIC of 2.3 and 2.65 mg/mL for strains of S. aureus, while the fraction F28 had MIC=1.75 mg/mL for S. aureus and Klebsiella pneumoniae. On the other hand, the MIC of fraction F4 of POS extract was 2.65 mg/mL. The phytochemical analysis performed to the strains POS, PCM, PAPO revealed the presence of reducing sugars, cardiac glycosides, sesquiterpenelactone, sterols and triterpenes. In conclusion, the fraction F28 of PCM parental strain showed have antimicrobial activity against Gram positive and Gram negative, presenting a MIC of 1.75 mg/mL for Staphylococcus aureus and Klebsiella pneumoniae. The phytochemical analysis practiced to F28 suggests that sterols and triterpenes are the metabolites responsible for the antimicrobial activity observed in Pleurotus spp.
Descripción : Se utilizaron 4 cepas parentales de Pleurotus spp. (POS, SEC, PCM y UAP9) y 8 cepas híbridas (PAUA, PAUB, PAPO, SAUA, SAUB, SAPA, SAPO Y UAPO). Las cepas fueron cultivadas y cosechadas para obtener extractos hexánicos y metanólicos a partir de los cuerpos fructíferos frescos. El método de difusión en agar de Kirby Bauer se empleó para determinar la actividad antibacteriana de los extractos sobre bacterias Gram positivas: Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus (ATCC 123989), Staphylococcus aureus aislamiento clínico (CINVESTAV-IPN) y Gram negativas: Klebsiella pneumoniae (ATCC 13884), Enterobacter agglomerans (ATCC 27155), Yersinia enterocolitica, Shigella dysenteriae (INDRE B2188) y Klebsiella rhinoescleromatis. Para el ensayo se prepararon sensidiscos con 8 mg de extracto y como control positivo se colocaron discos con 15 g de cloramfenicol. El método de microdilución en placa se utilizó para la determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI) de los extractos que presentaron actividad antibacteriana. Posteriormente, se realizó la cromatografía en columna de los extractos metanólicos de las cepas parentales PCM POS y UAP9 y el híbrido PAPO, y a las fracciones colectadas se les determinó la CMI utilizando un intervalo de concentraciones de 0.35 a 4 mg/mL. El ANOVA de dos vías indicó que la cepa híbrida PAPO presentó los diámetros de inhibición más grandes (11 a 15 mm) y que las bacterias Gram positivas Staphylococcus aureus y Bacillus subtilis fueron los microorganismos más sensibles. La fracción F9 del extracto de PCM presentó una CMI de 2.3 y 2.65 mg/mL para las cepas de S. aureus, mientras que la fracción F28 tuvo valores de CMI=1.75 mg/mL tanto para S. aureus como para Klebsiella pneumoniae. Por otro lado, la CMI de la fracción F4 del extracto de POS fue de 2.65 mg/mL. El análisis fitoquímico practicado a las cepas POS, PCM y PAPO reveló la presencia de azúcares reductores, glucósidos cardiacos, sesquiterpenlactonas, esteroles y triterpenos. En conclusión, la fracción F28 de la cepa parental PCM evidenció tener actividad antimicrobiana frente a bacterias Gram positivas y Gram negativas, presentándose una CMI de 1.75 mg/mL para Staphylococcus aureus y Klebsiella pneumoniae. El análisis fitoquímico practicado a F28 sugiere que esteroles y triterpenos son los metabolitos responsables de la actividad antimicrobiana observada en Pleurotus spp.
URI : http://www.repositoriodigital.ipn.mx/handle/123456789/15745
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