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http://repositoriodigital.ipn.mx/handle/123456789/12084| Título : | Inducción de péptidos antimicrobianos en epitelio de vías respiratorias |
| Autor : | DR. TERÁN JUÁREZ, LUIS MANUEL DR. ASBUN BOJALIL, JUAN GUANÍ GUERRA, EDUARDO |
| Palabras clave : | antimicrobial peptides host defense defensins nasal mucosa immunostimulants inactivated bacteria |
| Fecha de publicación : | 14-abr-2011 |
| Resumen : | Background. The airway epithelium produces antimicrobial peptides (AMPs) that prevent colonization of host tissues by a wide range of pathogens. Human β-defensin 2 (hBD-2) and Cathelicidine are the most well documented AMPs in humans. Several bacterial products and cholecalciferol have been implicated in the production of these peptides. Aim of study. To induce the production of hBD-2 and Cahtelicidine after stimulation of the respiratory epithelia with inactivated bacteria and cholecalciferol. Methods. First, an in vitro study stimulating A-549 cells with inactivated bacteria and cholecalciferol was conducted. After that a second in vivo study, where a nasal lavage (NL) was performed in 12 healthy volunteers in basal conditions, and after a nasal challenge with separate and subsequent stimuli with either inactivated bacteria (20 million), cholecalciferol (400 IU), the mixture of inactivated bacteria and cholecalciferol, or shamchallenge with glycerol plus isotonic saline solution. Finally, immunohistochemistry was performed in nasal biopsies 48 hours after stimulation with inactivated bacteria to identify the presence of hBD-2. Results. We were unable to detect hBD-2 or Cathelicidine by ELISA in the supernatant of A-549 cell cultures stimulated with inactivated bacteria and/or cholecalficerol. Increased levels of hBD-2 (4668.99 ± 2829.33 pg/ml) were measured with ELISA in NL fluids following bacterial challenge. Intriguingly, higher levels of hBD-2 were measured following the stimulation with the mixture of inactivated bacteria and cholecalciferol, when a student’s t test for dependent samples was applied (p= 0.013). However, hBD-2 concentrations were below the limit of detection in NL fluids at baseline, and after the administration of cholecalciferol alone or the sham-challenge. Through immunohistochemistry, hBD-2 was predominantly localized to the epithelium. Conclusions. hBD-2 can be induced in the nasal mucosa after administration of inactivated bacteria. Cholecalciferol could act as a synergistic agent in the production of hBD-2, at least in the nasal epithelium. Stimulation of the innate immune system to produce hBD-2 could be used to prevent or even treat infections caused by respiratory pathogens. 11 Key words: antimicrobial peptides; defensins; host defense; nasal mucosa; immunostimulants; inactivated bacteria. |
| Descripción : | Antecedentes. El epitelio respiratorio produce péptidos antimicrobianos (PAMs), que previenen la colonización por una amplia diversidad de patógeno. La β-defensina 2 humana (hBD-2) y la Catelicidina son los PAMs major documentados en humanos. Diferentes moléculas bacterianas y el colecalciferol han sido implicados su producción. Objetivo. Inducir la producción de hBD-2 y catelicidina después de la estimulación del epitelio respiratorio con bacterias inactivadas y colecalciferol. Métodos. Primero se realizó un estudio in vitro, estimulando células A-549 con bacterias inactivadas y colecalciferol. En un segundo estudio, esta vez con un modelo in vivo, se realizaron lavados nasales a 12 voluntarios sanos, en condiciones basales, y posterior a un reto nasal, donde por separado se estimuló con bacterias inactivadas (20 millones), colecalciferol (400 IU), mezcla de bacterias inactivada y colecalciferol, o con un placebo que contenía solución salina isotónica y glicerol. Finalmente se realizó inmunohistoquímica en biopsias nasales, después de la estimulación por 48 h con bacterias inactivadas, para identificar la presencia y localización de hBD-2. Resultados. No se detectó hBD-2 o catelicidina por ELISA en el sobrenadante del cultivo de células A-549, después de ser estimuladas con bacterias inactivadas y/o colecalciferol. Se detectaron niveles elevados de hBD-2 (4668.99 ± 2829.33 pg/ml) por ELISA, en el liquido de lavado nasal, posterior al reto con bacterias inactivadas. De manera interesante, cuando se aplicó una prueba t de student para muestras dependientes, se encontró que los valores de hBD-2 se incrementaban aún más, al estimular con la mezcla de bacterias inactivadas y colecalciferol (p=0.013). No se detectó hBD-2 posterior al reto nasal con colecalciferol solo, ni posterior al reto con el placebo. Por medio de inmunohistoquímica fue posible localizar a la hBD-2 en el epitelio. Conclusiones. la hBD-2 puede ser inducida en el epitelio nasal, tras la estimulación con bacterias inactivadas. El colecalficerol podría tener un efecto sinergistico con las bacterias inactivadas, en la producción de hBD-2, al menos en el epitelio nasal. La estimulación de la inmunidad innata para producir hBD-2, podría ser utilizada para prevenir e inclusive tratar infecciones causadas por patógenos respiratorios. |
| URI : | http://www.repositoriodigital.ipn.mx/handle/123456789/12084 |
| Aparece en las colecciones: | Mediateca |
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| Tesis PAM Docotrado Eduardo Guani.pdf | Inducción de péptidos antimicrobianos en epitelio de vías respiratorias | 1.41 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |
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